目的研究非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清miR-19b、miR-744-5p水平，分析其在NSCLC诊断中的临床价值。方法选择吉林省肿瘤医院2019年8月至2022年8月收治的NSCLC患者226例（NSCLC组）和健康体检者100例（对照组）为研究对象。采用实时荧光定量PCR测定并比较NSCLC组和对照组血清miR-19b、miR-744-5p水平，分析二指标与NSCLC患者不同临床病理特征的关系，采用受试者操作特征曲线分析miR-19b、miR-744-5p和二者联合检测诊断NSCLC的临床价值。结果与对照组比较，NSCLC组血清miR-19b水平显著升高（3.86±1.25比1.06±0.41，t=21.87，P<0.001），miR-744-5p水平显著降低（1.80±0.48比5.75±1.69，t=32.36，P<0.001）。病理类型为腺癌、肿瘤最大径≥3 cm、中低分化、Ⅲ~Ⅳ期、伴有淋巴结转移的NSCLC患者血清miR-19b水平分别高于鳞状细胞癌（t=5.94，P<0.001）、肿瘤最大径<3 cm（t=2.65，P=0.009）、高分化（t=4.33，P<0.001）、Ⅰ~Ⅱ期（t=12.32，P<0.001）、不伴有淋巴结转移患者（t=8.13，P<0.001），而miR-744-5p水平分别低于鳞状细胞癌（t=8.27，P<0.001）、肿瘤最大径<3 cm（t=5.34，P<0.001）、高分化（t=6.95，P<0.001）、Ⅰ~Ⅱ期（t=11.40，P<0.001）、不伴有淋巴结转移患者（t=10.36，P<0.001）。血清miR-19b联合miR-744-5p检测诊断NSCLC的曲线下面积（AUC）为0.914（95%CI为0.841~0.959），敏感性和特异性分别为90.9%和84.0%，AUC显著大于miR-19b（AUC为0.824，95%CI为0.770~0.869）、miR-744-5p（AUC为0.783，95%CI为0.709~0.838）单一指标检测（Z=2.28，P=0.021；Z=2.36，P=0.017）。结论NSCLC患者血清miR-19b水平升高、miR-744-5p水平降低，血清miR-19b、miR-744-5p联合检测在NSCLC诊断中具有较高的临床价值。